- 更新時間2016-08-10
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UV紫外光度計分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量, 相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,UV紫外光度計每種物質(zhì)就有其 *的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或 測 定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。因為不同的光譜帶寬對同一種藥品進行分析測試, 有不同的誤差, 所以,不同行業(yè)、應對光譜帶寬有不同的要求。因此, 使用者應根據(jù)分析工作的誤差要求來選取不同的光譜帶寬。特別是制藥行業(yè)、科研工作或要求較高的使用者, 更應如此。
UV紫外光度計利用紫外光譜可以推導有機化合物的分子骨架中是否含有共軛結(jié)構(gòu)體系, C=C 如 -C=C、C=C-C=O、苯環(huán)等。利用紫外光譜鑒定有機化合物遠不如利用紅外光譜有 效,因為UV紫外光度計很多化合物在紫外沒有吸收或者只有微弱的吸收,并且紫外光譜一般比較簡 單,特征性不強。利用紫外光譜可以用來檢驗一些具有大的共軛體系或發(fā)色官能團的 化合物,可以作為其他鑒定方法的補充。
UV紫外光度計在正式使用一臺新的儀器以前, 一般都先對儀器的線性進行測試。但大多數(shù)使用者只是在某一試樣的某一濃度附近, 用濃度的倍數(shù)變化, 測出這一段的線性。這只能反映儀器在小范圍內(nèi)的實用情況, 并不能說明儀器的線性是否符合出廠指標, 也不能反映儀器的線性范圍。為了全面了解UV紫外光度計的線性, 還需按下述方法進行測試。
UV紫外光度計不同的試樣要求用不同的光譜帶寬來分析, 應該選擇*或靠近*的光譜帶寬來分析, 才能得到*分析結(jié)果。光譜帶寬不能過大或過小。選擇光譜帶寬度方法是, 在一定實驗條件下測試吸光度隨光譜帶寬度變化, 以獲得zui大吸光度值的光譜帶寬作為欲選擇的光譜帶寬。UV紫外光度計前面談到的測試同一濃度的青霉素鈉、青霉素鉀的例子, 0. 3nm 光譜帶寬是*光譜帶寬, 比0. 3nm 大和小的光譜帶寬, 測試的吸光度值都比0. 3nm 光譜帶寬的小。